Située sur la Via Salaria, la catacombe s'étend sur deux étages et tire probablement son nom d'une Priscilla de la famille sénatoriale des Acili, dont le nom apparaît dans l'une des inscriptions de l'hypogée des Acili au premier étage.

Son origine est différente de celle des autres catacombes puisqu'à l'origine le lieu était un arénarium, puis abandonné.

Les chrétiens ont commencé à utiliser les galeries larges et irrégulières qui constituent le premier étage de la catacombe vers le début du troisième siècle, en construisant une vingtaine de tombes à niche et en creusant des centaines de niches dans les murs.

Dans une zone adjacente se trouve le cryptoportique avec la chapelle grecque et un vaste environnement souterrain, né comme cimetière de familles nobles et ensuite relié à la catacombe.

Parmi les martyrs enterrés à Priscilla, nous rappelons les frères Felice et Filippo, qui furent martyrisés, probablement sous Dioclétien, avec leur mère sainte Felicita et les cinq autres frères Alessandro, Marziale, Vitale, Silano et Gennaro.

De nombreux papes ont également été enterrés à Priscilla : Marcellino (296-304), Marcello (308-309), Silvestro (314-335), Liberius (352-366), Siricius (384-399), Celestino (422-432) et Vigilius (537-555).

Dans l'hypogée des Acili, à l'origine une citerne d'eau, les inscriptions des Acili ont été retrouvées et exposées. A l'intérieur de la Villa Ada se trouve la Basilique construite par le Pape St. Silvestro en correspondance avec la tombe de Felice et Filippo. Dans une zone proche de la basilique, un musée a été installé qui rassemble des centaines de fragments de sarcophages trouvés lors des fouilles dans la zone de la catacombe.